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乳酸菌精简办法及显微镜运用办法 榜首部分：乳酸菌镜检能够釆用革兰氏染色办法。 第二部分：运用显微镜的油镜进行镜检， 下面是详细的染色办法和镜检办法，请参阅。 榜首部分：乳酸菌革兰氏染色办法 1意图 在乳酸菌发放之前，判辨规范的革兰氏染色法对行将发 放的乳酸菌悬液或乳酸菌样品进行细心的检测，调查乳酸菌乳酸菌在 显微镜下的形状。 2原理 经过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶 于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌不刊之论其细胞壁较 厚、肽聚糖网层次较多且交联平常，故遇乙醇脱色处理时， 因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不 会呈现缝隙，因而能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使 其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含 量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主 的外膜敏捷溶解，薄而松懈的肽聚糖网不能阻挠结晶紫与碘 复合物的溶出，因而经过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等 赤色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈赤色。 3试验用品预备： 灭菌玻片、10-lOOul移液器、10-100U1灭菌移液吸头、 100ul-1000ul移液器、100ul-1000ul移液吸头、接种环、酒 精灯、打火机、革兰氏染色液、吸水纸、显微镜、香柏油、 擦镜纸、计时器 4操作： 1涂片：取灭过菌的载玻片于试验台上，用移液枪汲取10ul待检 样品滴在载玻片的中心，用烧红冷却后的接种环将液滴 涂布成一均匀的薄层，涂布面不宜过大。 2枯燥:将标本面向上，手持载玻片一端的认识，小心肠在酒精灯 上高处轻轻加热，使水分推让，但切勿紧靠火焰或加热 时刻过长，以防标本烤枯而变形。 3固定：固定常常判辨高温，手持载玻片的一端，标本向上，在酒 精灯火焰处赶快的来回经过2-3次，共约2-3秒种，并 不时以载玻片反面加热触及皮肤，不觉过烫为宜（不超 过60°C）,放置待冷后，进行染色。 4初染：在涂片薄膜上滴加草酸鞍结晶紫1-2滴，使染色液掩盖涂 片，染色约Imino 5水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲刷，直至洗下 的水呈无色遵从。 6媒染：用100-1000U1移液枪汲取约300ul碘液滴在涂片薄膜上, 使染色液掩盖涂片，染色约Imino 7水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲刷，直至洗下 的水呈无色遵从。 8脱色：斜置载玻片，滴加95%乙醇脱色，至流出的乙醇不现紫色 遵从，大约需时20-30S,随即水洗。 9复染：在涂片薄膜上滴加沙黄染液1-2滴，使染色液掩盖涂片， 染色约Imino 10水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲刷，直至洗 下的水呈无色遵从。 11枯燥、调查：用吸水纸吸掉水滴，待标本片干后置显微镜下， 用低倍镜调查，发现意图物后滴一滴浸油在玻片上，用 油镜调查细菌的形状及色彩，紫色的是革兰氏阳性菌， 赤色的是革兰氏阴性菌。 5清场 试验完毕后，将显微镜油镜上的残留的香柏油用擦
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